[P29-27] マウス精巣におけるNRTNの発現解析
【目的】継続的な精子形成は，精原幹細胞(SSC)の自己複製により維持されている．これまでにマウスSSCの自己複製はグリア細胞株由来神経栄養因子(GNDF)に依存し，線維芽細胞増殖因子2 (FGF2)がGDNFの効果を増強することを示してきた．一方で自己複製を促す他の液性因子の存在も示されており，本研究では，GDNF Family Ligands(GFLs)の一つであるニュールツリン(NRTN)のマウスSSCの増殖因子としての可能性を検討した．【方法】1-8週齢のC57BL/6マウスの脳，肝臓，肺，腎臓，心臓，精巣からタンパク質抽出液を調整し，抗NRTN抗体を用いたウエスタンブロット(WB)解析を行った．また1-8週齢のマウス精巣においては，qRT-PCR法によりGFLs及びそのレセプターの発現を解析した．NRTNのSSCに対する増殖効果はC57BL/6マウス由来SSCの無血清培養系にて評価した．【結果】WB解析の結果，全週齢において，分泌型NRTNの発現量は精巣で最も高かった．また1-8週齢の精巣のqRT-PCR法では，Nrtn発現量に変化は見られなかったが，NRTNレセプターGfra2は1週齢において発現が最も高く，その後減少した．さらに無血清条件下でNRTNがSSCの自己複製をサポートすることが明らかとなった．