3. Reproduction/Reproductive technology

[P3-33] 絶滅危惧種アマミノクロウサギ由来の無限分裂細胞および体細胞クローンの作製

〇Tomokazu Fukuda¹, Ai Orimoto¹, Masafumi Katayama⁵, Tetsuya Tani³, Keiko Ito⁷, Takahiro Eitsuka⁴, Kiyotaka Nakagawa⁴, Miho Mirayama⁶, Manabu Onuma⁵, Tohru 福田 kiyono² (1.Iwate University, Graduate School of Science and Engineering, 2.National Cancer Center Research Institute, 3.Kindai University, 4.Tohoku university, 5.National Institute of Environmental Studies, 6.Kyoto university, wildlife research center, 7.Amami Dog and Cat Animal Hospital, Amami Island, Japan)

「研究背景および目的」アマミノクロウサギは我が国の天然記念物であり絶滅危惧種である。奄美大島、徳之島、沖縄島北部及び西表島世界自然遺産登録され、観光化が進み不幸なロードキル個体が増加している。我々はこの不幸なロードキル個体の体細胞から初代培養により、培養細胞を作製することを発想した。加えて無限分裂細胞を作製することを試みた。無限分裂する細胞を用いれば、世界中の研究者と研究材料として共有が可能になる。また、無限に分裂するために高品質な同一個体から全ゲノム解析に必要な大量の高純度ゲノムDNAの抽出が可能になる。

「材料および方法」ロードキルされたアマミノクロウサギの２個体筋肉から初代培養を行なった。得られた初代細胞を元に核型解析を行い正常な２個体を選抜した。その後レンチウィルスにより変異型サイクリン依存性キナーゼ4(CDK4), cyclinD1、テロメア逆転写酵素(TERT)を導入した。得られた細胞を元に、細胞周期、導入遺伝子の確認、生物学的性質を解析した。「結果および考察」得られた初代培養細胞へ効率よく遺伝子導入が可能になった。また連続パッセージにより野生型細胞と比較し、細胞増殖速度が加速していることが明らかとなった。本発表では詳細な生物学的性質に関して発表する予定である。