[S3-2] Genome and infection of broad-host-range jumbo phage Infecting Bacillus cereus group
ゲノムサイズが200 kbp以上のファージはJumboファージと呼ばれ，一般的なファージよりも粒子が大きい．Jumboファージの分離例は，2021年現在224種だが，グラム陽性菌を宿主とするものは9種しか報告例がなく，その内6種はBacillus属を宿主としている．また，Jumboファージは，宿主のものとは異なる独自のDNA，RNAポリメラーゼを持つものもあり，宿主への依存性を低下できる．このため宿主域が広がり，水平伝播などで外来遺伝子を取り込む機会が増えると推測される．さらに，いくつかのJumboファージでは，小ゲノムサイズのファージにはない宿主認識やDNAの包込みに機能すると考えられる構造や，宿主の制限修飾系やCRISPR/Cas等の免疫から回避する構造も報告されている等，興味深い特徴を有する．そこで我々は，Bacillus cereus HT18株を宿主とし，森林土壌からvB_BceM_ WH1を分離した．本ファージは，直径約100 nmの正二十面体の頭部，約300 nmの収縮性尾部を持ち，Myooviridae科に分類されるJumboファージであった．vB_BceM_WH1はB. thuringiensis，B. mycoidesなどB. cereusグループの株に感染し，広い宿主域を示した．ゲノム解析の結果，vB_BceM_WH1ゲノムは229,829 bpで300個のORFが推定された．溶菌液から超遠心分離法によりファージ画分と推定されるバンドを回収し，ESI-MS解析を行ったところ，ファージタンパク質と共に，宿主の鞭毛構成タンパク質Flagellinが多量に検出された．この事から，Flagellinが本ファージのレセプターと推測し，大腸菌で発現させた組換えFlagellinとファージタンパク質の相互作用を検討し，他のB. cereusグループ株のFlagellinとの構造を比較した．