[I-YB05-2] 過去のFFPE切片からを用いたRNAトランスクリプトーム解析および高感度in situ hybridization法による乳児特発性僧帽弁腱索断裂の病態および病原微生物の検討
キーワード：mitral valve regurgitation, transcriptome assay, in situ hybridization
[背景と目的]乳児特発性僧帽弁腱索断裂における僧帽弁および腱索組織の心内膜には、単核球を中心とした炎症細胞浸潤が認められ(Circulation 2014;130:1053)、病因としてウイルス感染、川崎病、母親由来の抗SSA抗体などが示唆されている。本疾患は発症が年間10数例と希少で、また搬送直後に手術に向かうために、病因解明のための系統的なサンプル収集が困難となっている。そこで今回我々は、過去の病理組織標本から最新の遺伝子工学的手法を駆使して、本疾患の病態と病因解明を試みた。[対象と方法]僧帽弁置換した腱索断裂乳児４例(断裂群：生後3-6ヶ月(中央値4ヶ月)、川崎病およびSSA抗体陽性例を除く)と弁置換した先天性心疾患２例(対照群：生後11および13ヶ月)のパラフィン包埋された僧帽弁および腱索標本からRNAを抽出し、トランスクリプトームおよびメタトランスクリプトーム解析を行った。一部の切片は高感度ISH法を併用した。[結果]病態解明を目的としたトランスクリプトーム解析では、断裂群で対照群に比べて1,192の遺伝子に有意な変化(x10以上or 0.1以下)が認められ、免疫応答を主体としたシグナル伝達系の亢進が確認された。病原微生物の検索を目的としたメタトランスクリプトーム解析では、断裂群４例中２例に小児に一般的な感染症を引き起こすDNA virus Xに高い相補性が検出された。高感度ISH法でも、断裂群の組織片に心内膜を主体とするvirus XのRNAシグナルが確認された。[考察]今回の結果は検体数が少なく更なる追試が必要ではあるが、本疾患では僧帽弁および腱索に何らかの炎症とそれに対する免疫応答が存在すること、その引き金としてvirus Xが関与している可能性が示唆された。今後は患者の入院時の血液や咽頭拭い液などの新鮮なサンプルも解析し、virus Xの関与を検証する予定である(メタトランスクリプトーム解析は、大阪大学微生物病研究所の中村昇太博士、元岡大祐博士の協力を得て実施した)。