[P1-2-24] Functional analysis of PorE, an essential molecule in the type 9 secretion system of the periodontal bacterium Porphyromonas gingivalis.
Keywords:歯周病、Porphyromonas gingivalis、T9SS
【目的】グラム陰性細菌Porphyromonas gingivalisは慢性歯周炎の最重要病原細菌の一つである．本菌の病原因子であるジンジパイン(強力なプロテアーゼ)を含む多くのタンパク質は, 9型分泌機構(T9SS)を介して菌体表面・菌体外へ分泌される．T9SS構成タンパク質の一つであるPorE(PGN_1296)はリポタンパク質として外膜内葉に局在すること, N末端よりTPR, PD40, CarboxypepD reg(Carbo), OmpAという4つのドメインからなりC末端のOmpAドメインにはペプチドグリカン(PG)結合モチーフが存在し, PGと結合する可能性が報告されていた．我々はT9SS必須分子の網羅的解析からOmpAドメインが機能に必須ではないと推測していた．本研究では PorE各ドメインの機能や発現メカニズムについて調べた．【方法】1)PorEのTPRドメインを除く3つのドメイン欠損変異体を作製し, 機能的であるかを調べた．2)上記の機能ドメイン欠損変異体におけるPorEの局在変化を調べた．3)PorE発現に必須のT9SS構成タンパク質があるか否かを調べた．【結果】1) PD40ドメイン欠損体ではPorE発現が消失, OmpAドメイン欠損体はT9SS機能が消失した．PG結合モチーフ変異体でも一部T9SS活性低下を認めた．2) OmpAまたはCarboドメイン欠損変異体はPorEの局在が変化した．3) PorE発現にはPorPの存在が必須であり，PorEに付けたタグを用いた免疫沈降でPorPが検出された．【考察】PD40 およびOmpAドメインを介したPGとの結合がPorE機能に必須であり, Carboドメインは必須でないことを見出した. 残るTPRドメインの機能やT9SS全体におけるPorE-PorP複合体の役割など, 今後さらなる検討が必要である．