Poster session

[P2-3-20] An efficient method of inducing differentiation of dental pulp stem cells into insulin-producing cell.

〇Yuki Shimoura¹, Momoka Ando¹, Tomoko Tanaka², Moeka Araki², Masanori Nasu¹, Tetsuro Horie^1,2 (1. Ctr Odont, Nippon Dent Univ Sch Life Dent at Tokyo, 2. Dept Oral Health, Nippon Dent Univ Sch Life Dent at Tokyo)

Keywords:歯髄幹細胞、インスリン、再生医療

歯髄幹細胞（Dental pulp stem cells、以下DPSCs）は、人工多能性幹細胞や胚性幹細胞のように、遺伝子導入の必要や、倫理的な問題がないことから、安全で法的障壁が低く、実用的な再生医療の細胞源として期待されている。我々は、DPSCsのインスリン産出細胞(Insulin-producing cell、以下IPC)への分化誘導法の確立に取り組んできた。今までに、DPSCsをIPCへと分化誘導させるために、DPSCsから分離したCD117陽性細胞を細胞源として、生理活性濃度の硫化水素と超低接着表面シャーレを用いた3次元培養を組み合わせた新規の培養系を確立した。また、このIPCを糖尿病モデルラットの腎皮膜下に移植したところ、高血糖などの病態を改善することがわかった。
一般的にIPCへの分化は、幹細胞から胚体内胚葉細胞、膵前駆細胞、膵内分泌前駆細胞を経由してIPCへと至るとされている。しかし分化途上の細胞の一部はIPC以外の細胞へと分化し、再生医療の障害となる。今回、DPSCsを効率よくIPCに分化させるために、培養条件の最適化を試みた。継代回数の制約や個体差のある通常のDPSCsではなく、株化されたDPSCsを実験に用いることで、試行回数や条件を増やし、より最適な培養条件を決定することを目的とした。分子マーカーの発現量を定量的にモニターし、各分化段階で正しく分化誘導されているか逐次確認しながら、培養条件の調整を行った。その結果、膵臓形成に必要な遺伝子Pdx1の発現量を飛躍的に上昇させるが、目的外の細胞の分化マーカーの発現を低く抑えた分化細胞を取得することに成功した。現在、新しくできたIPCのインスリン分泌能やグルコース濃度応答性などの生理的機能について調べている。