繁殖・生殖工学

[IV-18-04] 精子受精能におけるリラキシンの役割

*皆川 至¹、Hoang Xuan Khoi²、小林 仁³、佐々田 比呂志⁴、高坂 哲也¹ (1. 静岡大農、2. 静岡大院総合科学、3. 宮城大食産業、4. 北里大獣)

【目的】リラキシン（ＲＬＮ）は精子の先体および中片部に分布する約８５ ｋＤａの受容体ＲＸＦＰ１に結合し，機能発現する可能性を示唆した．本研究では，ブタ精子におけるＲＬＮの受容体シグナリングを調べ，精子受精能への関与を究明した．【方法】ブタ精子は精巣上体尾部精子を用いた．まず，精子膜画分を調製し，ＲＬＮとの結合親和性を分子間相互作用解析装置で調べた．次に，精子をＲＬＮで暴露処理し，細胞膜コレステロール，細胞内ｃＡＭＰ，タンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）活性，タンパク質チロシンリン酸化，Ｅ-ｃａｄｈｅｒｉｎ発現などを解析した．次いで，ＣＴＣ法による精子の受精能獲得の評価を行った．【結果】ＲＬＮは精子膜分画に対してＫｄ値１．６５ ｎＭで結合することがわかった．次に，精子へのＲＬＮ暴露はコレステロール放出を誘起し，細胞内ｃＡＭＰの上昇とＰＴＫ活性の変動をもたらし，受精能獲得時にみられるｐ４０（４０ ｋＤａのタンパク質）のチロシンリン酸化が検出された．ＣＴＣ法による評価では，ＲＬＮ暴露は受精能獲得を明らかに誘起していた．なお，Ｅ-ｃａｄｈｅｒｉｎの発現上昇はみられなかった．【結論】ＲＬＮは受容体に高い親和性で結合し，精子膜コレステロールの放出を促し，ｃＡＭＰによる受容体シグナリングを介して，精子受精能獲得に関わるタンパク質のチロシンリン酸化を刺激し，精子の受精能に関与することが示唆された．