4. Morphology/Physiology

[P4-24] 培養脂肪細胞由来エクソソームに含まれるmicroRNAのプロファイリング

〇Koichi Ojima¹, Susumu Muroya¹, Hiromu Wada², Kotaro Ogawa², Mika Oe¹, Koichi Takimoto², Takanori Nishimura³ (1.NARO Institute of Livestock and Grassland Science, 2.Nagaoka Univ. Tech., 3.Hokkaido Univ.)

【背景・目的】microRNA (miRNA)は21-25塩基長の1本鎖RNAであり、遺伝子発現を抑制する機能を持つ。一方、エクソソームは細胞が分泌する直径50-200nmの小胞であり、分泌する細胞由来miRNAなどを含んでいる。しかし、どのような種類のmiRNAがエクソソームに含まれるのかについては不明な点が多い。そこで、本研究では脂肪前駆細胞であるマウス3T3-L1細胞が分化過程で分泌するエクソソームに含まれるmiRNAのプロファイリングを目的とした。【方法】分化誘導後3T3-L1細胞から経時的に培養上清を回収し、超遠心法にてエクソソーム画分を調製・定量した。エクソソーム画分から全RNAを精製し、miRNAのマイクロアレイ解析に供した。【結果】分泌されるエクソソーム量は脂肪分化が進むにつれ減少したが、分化10日目（DM10）以降再び増加した。DM0、DM4、およびDM12のエクソソーム画分のmiRNAを用いたマイクロアレイ解析では329、426、および406種のmiRNAを検出した。miRNAの標的となる遺伝子のGene Ontology解析を行った結果、転写制御に関する複数のBiological Process項目が候補として挙がった。本結果は、脂肪細胞由来エクソソームに含まれるmiRNAが細胞の転写活性を制御している可能性を示唆している。