形態・生理2

[IV-16-25] 卵黄輸送能が異なるIgY変異体とホスホリパーゼA2受容体の分子間相互作用解析

*Mayuko Okamoto¹, Ryo Sasaki¹, Takaaki Kojima², Atsushi Murai¹ (1. Nagoya Univ., 2. Meijo Univ.)

［目的］母ドリの血中IgY抗体は卵黄へ選択的に輸送されるが、その仕組みは不明である。このIgY輸送を担う受容体の候補として、卵黄嚢から胚循環血へのIgY輸送を担うホスホリパーゼA2受容体（PLA2R）に注目した。本研究では、IgYとPLA2Rの分子間相互作用を解析し、卵黄へのIgY輸送におけるPLA2Rの寄与を考察した。
［方法］実験１: 分泌型のPLA2Rを固相化した96 well plateを用いて、PLA2Rに対するウズラIgY-Fcの野生型（WT）、卵黄輸送能が異なる2種類の変異体（Y363A、G365A）の結合量を解析した。さらに、ジゴキシゲニン標識したウズラIgY（DIG-IgY）との競合試験を行った。実験２：分子間相互作用解析システム BLItz を用いて、PLA2Rに対するWT、Y363A、G365Aの結合量と動態を解析した。
［結果］実験１：卵黄へ輸送されないY363Aは、PLA2Rへの結合量がWTよりも約2倍多いことが判明した。WTよりも卵黄輸送能が高いG365Aは、DIG-IgYの結合を強く競合阻害した。実験２：WTと比較して、G365AはPLA2Rへの結合速度が約2.1倍速く、Y363Aは解離速度が約4.3倍遅くなった。
［結論］卵黄輸送能が異なるIgY変異体はPLA2Rとの結合量と動態が異なることが判明し、PLA2Rが卵黄へのIgY輸送に関与する可能性が示唆された。