[ODP6B] b. Toxins, Effectors, and Bioactive Substances

[ODP-148] Inhibitory effect of nitric oxide on Subtilase cytotoxin

○Hiroyasu Tsutsuki¹, Tianli Zhang¹, Kinnosuke Yahiro², Katsuhiko Ono¹, Takaaki Akaike³, Tomohiro Sawa¹ (¹Dept. Microbiol., Grad. Sch. Med. Sci., Kumamoto Univ., ²Dept. Mol. Infectiol., Grad. Sch. Med., Chiba Univ., ³Dept. Environ. Med. Mol. Toxicol., Grad. Sch. Med., Tohoku Univ.)

【目的】腸管出血性大腸菌O113株から同定された毒素Subtilase cytotoxin（SubAB）は，小胞体（ER）シャペロンであるBiPを切断し宿主細胞にERストレス性の細胞毒性を示す。我々は以前，SubABがマクロファージの一酸化窒素（NO）産生を抑制し，大腸菌の生存を亢進することを報告した。しかしSubABの毒性発現におけるNOの影響や酸化還元（レドックス）調節機構の関与はこれまで不明であった。そこで本研究では，SubABによる毒性発現にNOがどのような影響を及ぼすか調べることを目的とした。
【方法】ヒト上皮由来HeLa細胞にNOドナー存在下でSubABを処理した。SubABによるBiPの切断はウェスタンブロッティングにて解析した。各種阻害剤およびsiRNAを用い，宿主レドックス分子を探索した。
【結果と考察】NOドナー処理を行ったHeLa細胞ではSubABによるBiP切断が阻害された。阻害剤やsiRNAを用いた実験から，glutathione S-transferase（GST）の一種であるGSTPがSubABの毒性発現に関与することが示唆された。GSTPノックダウン細胞をNOドナーで処理しSubABによるBiP切断を評価した結果，コントロール細胞ではNOドナーによりSubABのBiP切断が阻害されたが，GSTPノックダウン細胞ではNOドナーによる阻害が回復した。以上の結果から，NOがSubABの阻害剤になること，GSTPが宿主レドックス調節分子としてNOによるSubABの阻害に寄与することが示唆された。現在，NOによるSubABの抑制機構について詳細な解析を進めている。