The 95th Annual Meeting of Japanese Society for Bacteriology

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[ODP4] 1. Taxonomy / Epidemiology / Infectious diseases -d. Methods for detection, identification, and diagnosis

[ODP-020] Identification of capsular type of Streptococcus pneumoniae using LAMP method

Takahiro Iijima1, Chika Takano2, Mitsuko Seki1,2, Chang Bin3, Satoshi Hayakawa2, Tomonori Hoshino1 (1Dept. Pediatric Dentistry., Sch. Dent., Meikai Univ., 2Dept. Microbiol., Sch. Med., Nihon Univ., 3Dept. Bacteriology I., NIID)


【背景】肺炎球菌ワクチンの導入以来,肺炎球菌感染症は減少している.しかし,ワクチンターゲット以外の莢膜型による肺炎球菌感染症が報告されている.同菌の莢膜型の簡便な検出法は,国内や世界的な感染症の動向を知り,効果的なワクチン接種計画および感染抑制において有用である.今回,我々は23価肺炎球菌多糖体ワクチン(PPSV23)に含まれる莢膜型(2,8,9N,10A,11A,12F,15B,17F,20, 22F,33F)を迅速かつ簡便,安価に同定する目的から,loop-mediated isothermal amplification(LAMP)法を用いた検出法を開発したので報告する.
【方法】各莢膜型に特異的な塩基配列に対しLAMP法のプライマーを設計した.23種の莢膜型及び関連する莢膜型を有する基準株及び臨床分離株計55株を用いて,新たに開発された方法の検出感度および検出特異度を従来法のPCR法と比較し評価した.
【結果】LAMP法の特異度は良好で,ワクチンターゲット以外の莢膜型との交差反応を認めなかった.また,LAMP法は102DNAコピーまでの検出が可能であり,PCR法と同等もしくはそれ以上の感度を認めた.
【考察】LAMP法は迅速かつ簡便な検査法であり,世界各国で使用できる可能性があるが,疫学調査への応用にはさらなる臨床的評価が必要である.
共同研究者; Lee J, Yoon Y, Kim EJ, Lee D, Baek Y, Kim DW, Hanyang Univ., Korea; Kilgore PE, Wayne State Univ., USA