[ODP-112] Critical residues of Clostridium perfringens delta-toxin for biological activity
BとC型ウエルシュ菌が産生するデルタ毒素は，分子量32kDaのタンパク毒素で，pore-forming-toxin（PFT）に属し，細胞膜上でオリゴマーを形成して溶血や細胞死などの生物活性を示す．今回，デルタ毒素の活性発現に重要なアミノ酸残基を検討するため，その構造から，細胞内侵入に関与するステムドメインの224位セリン残基，細胞膜結合に関与するリムドメインの81位と201位チロシン残基を，それぞれY81A，Y201A，S224Aにアミノ酸残基の置換を行い，その作用を検討した．MDCK細胞，A549細胞，及びCaco-2細胞に対する毒性を検討すると，ワイルドタイプ（WT）と比較して，Y81Aは毒性が低下し，S224AとY201Aは毒性を示さなかった．次に，変異毒素の細胞への結合を比較すると，いずれの細胞においてもY81AとWTは同程度にモノマーとオリゴマーの結合が認められた．一方，Y201Aは結合が認められず，S224Aはモノマーの結合は，WTと同程度で，オリゴマーは少なかった．以上より，本毒素の81位チロシン残基は細胞に結合し毒素活性を示すことから，毒素活性への関与は低いと考えられる．これに対して，201位チロシン残基は細胞に全く結合しないので，細胞膜への結合に関与し，224位セリン残基は，オリゴマー形成能が低く，活性をほとんど示さないことから，オリゴマー形成に関与すると考えられる．