[ODP22] 5. Pathogenicity -b. Toxins, effectors and physically active substances

[ODP-116] Role of calcium channels in COX-2 expression and PGE2 production by gingipains

Masaaki Nakayama¹, Mariko Naito³, Koji Nakayama³, Naoya Ohara^1,2 (¹Dept. Oral Microbiol., Okayama Univ. Grad. Sch. Med. Dent. Pharm. Sci., ²ARCOCS, Okayama Univ. Dent. Sch., ³Dept. Microbiol. Oral Infect., Nagasaki Univ. Grad. Sch. Biomed. Sci.)

Porphyromonas gingivalis（Pg）は歯周病細菌として慢性歯周炎に深く関連する．歯周炎ではCOX-2発現とPGE2産生が認められる．我々はこれまでに単球系細胞に対するPg感染により，本菌が産生するジンジパイン（Gps）がCOX-2発現とPGE2産生に関与し，さらにその分子解析から細胞外から流入する細胞内カルシウム（Ca²⁺）の濃度上昇が重要であることを示してきた．本会では，GpsによるCOX-2発現とPGE2産生における細胞内Ca²⁺供給に関わるCa²⁺チャネルを介した分子解析を行ったので報告する．細胞外Ca²⁺キレート剤EGTAとCa²⁺チャネル阻害剤SKF-96365を用いて，Pgによる単球系細胞株THP-1に対する感染実験を行ない，ERKとIKKの活性化，AP-1構成因子のc-Junとc-Fosの発現と活性化，およびCOX-2発現とPGE2産生における各薬剤による効果を調べた．各タンパク質の発現と活性化は特異的抗体を用いたWestern blotting法にて，PGE2産生はELISAにて評価した．その結果，各薬剤の処理によって，ERKとIKKの活性化，c-Junとc-Fosの発現と活性化，COX-2の発現は未処理のものと比べて抑制された．さらにPGE2産生に対する各薬剤の効果を調べた結果，未処理のものと比べて抑制された．以上のEGTAとSKF-96365を用いた実験から，GpsによるCOX-2発現やPGE2産生に繋がるメカニズムとして，細胞膜上のCa²⁺チャネルによる細胞外からのCa²⁺流入が必要であることが示唆された．