[ODP-128] Functional analysis of a novel cell wall-anchored glycosidase of Streptococcus intermedius
【目的】ヒト口腔内常在菌のS. intermedius（SI）は，日和見的に深部臓器に重篤な膿瘍感染症を引き起こす．我々は，細胞壁アンカータンパク質であるMsgAやNanAなどのグリコシダーゼによる糖鎖分解産物がSIの主要病原因子であるインターメディリシンの発現を活性化することを明らかにしている．SIは，それら以外にGH85ドメインを保有しエンドN-アセチルグルコサミニダーゼ（ENGase）を示す可能性がある細胞壁アンカー型タンパク質（ENGと仮称）をコードする遺伝子を保有する．そこで，ENGがENGase活性を示すか否かを調べる目的でこのタンパク質の発現・精製を行った．
【方法】ENGの精製は，このタンパク質に6Hisタグを連結しNi-NTAカラムを用いることで行った．エンドN-アセチルグルコサミニダーゼ活性の有無はコロイドキチンや糖タンパク質（α1-アンチトリプシン，ホロトランスフェリン，フェチュイン）の糖鎖分解活性を調べることで行った．
【結果と考察】ENGにコロイドキチンや糖タンパク質を作用させても，これまでのところ糖鎖分解活性は確認されなかった．しかしながら，ENGと糖タンパク質を混合してNi-NTA樹脂を用いてプルダウンアッセイを行った結果，ENGと糖タンパク質が相互作用している可能性を示す結果が得られた．現在，この結合が糖タンパク質の糖鎖とGH85ドメインの結合によるものか否かについて解析を進めている．さらに，この結合がSIの病原性に果たす役割についての解析も進めている．
【会員外共同研究者：多田 雄哉（徳島大・生物資源産業学部）】