[ODP28] 6. Host defense -b. Acquired immunity, vaccines and prevention and control of infections

[ODP-183] Development of novel neutralizing human monoclonal antibodies against tetanus neurotoxin

Ryota Otsubo^1,2, Toshihiro Ito³, Teruhito Yasui^1,2,4 (¹Laboratory of Infectious Diseases and Immunity, National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition, ²Lab. Immunobiologics Evaluation, Center for Vaccine and Adjuvant Research, National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition, ³Lab. Proteome Research, National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition, ⁴Lab. Pharmaceutical Integrated Omits, Dept. Pharmaceutical Engineering, Fac. Engineering, Toyama Prefectural Univ.)

破傷風は破傷風神経毒（Tetanus Neurotoxin :TeNT）によって引き起こされる致命的な疾患である．TeNTは，ペプチターゼ活性を有した軽鎖（Lc）と重鎖（Hc）で構成されている．さらに，Hcに関しては，N末端側に細胞内移行ドメイン（Hn）とC末端側にレセプター結合ドメイン（Hc）の2つのドメインに分類される．これまでいくつかのTeNT中和抗体が報告されている．しかし，それらの抗体が，どのTeNTドメインを認識し，中和に関与しているのか作用機序が不明である．今回，我々は，どのTeNTドメインが中和活性抗体の抗原として機能するのかを明らかにするために，ヒト末梢血単核細胞からTeNT結合性ヒト抗体クローンを単離した．次に，これらの抗体にについて，TeNTの各ドメイン（Lc, Hn, Hcとこれら3種を混合したTeNT mix）のリコンビナントタンパク質を用いて結合性を評価し，ドメイン結合性により分類した．さらに，どのドメイン結合性抗体がTeNT中和活性に重要かを評価するために，ドメイン結合性ごとにリコンビナント抗体を作製し，マウスモデルを使って各抗体単独での中和能を評価した．その結果，Hn結合性抗体がTeNT毒性による致死を最も強く阻害した．さらに，HnとHc，TeNT mix結合性リコンビナント抗体を混合すると単独と比較して，中和効果が飛躍的に向上することが明らかとなった．