[ODP31] 7. Antimicrobial agents and resistance -b. Antimicrobial resistance

[ODP-205] Increased tellurite resistance by a nonsynonymus mutation on tehA gene in EHEC O157

Ryuya Akasaka^1,2, Yuko Matsumoto³, Kenichi Lee², Mitsumasa Koizumi³, Hisao Sato⁴, Yukihiro Akeda², Makoto Ohnishi², Sunao Iyoda² (¹Tokyo Coll. Biotech., ²Dept. Bacteriol. 1, Natl. Inst. Infect. Dis., ³Yokohama Inst. Pub. Health, ⁴Japan Microbial Research Inst Co., Ltd.)

【目的】腸管出血性大腸菌（EHEC）O157の多くは亜テルル酸カリウム（PT）への耐性遺伝子群（terオペロン）を有するため，分離には選択剤としてPTを含む培地が広く用いられている．2018年に分離されたEHEC O157をPT含有培地に塗抹したところ，大小不同のコロニーが認められた．全ゲノム配列解析を行った結果，両コロニーの株ともterオペロンを保有せず，大コロニーの株には別のPT耐性遺伝子（tehA）上に1か所の非同義置換（Ala299Thr)が存在した．そこで，同変異がPT耐性に与える影響の解析を行った．
【材料・方法】Y32821（小コロニー，Sakaiと同様のtehA）またはY32859（大コロニー，変異型tehA）が有するtehAB発現プラスミドをY32859tehAB欠失変異株に導入し，相補株を作製した．これらを用いて，PTへの最小発育阻止濃度（MIC）を測定した．また，野外株でのterオペロンの欠失およびtehAの変異頻度を，感染研・細菌第一部でゲノム解読をしたEHEC O157 1,668株を対象にBLAST検索で調べた．
【結果・考察】Y32859はterオペロンを有するSakai株と同等のMIC値（100 μg/ml）を示した一方で，Y32821は低い値（6.25 μg/ml）を示した．tehAB欠失変異株では，MIC値は低下し，変異型tehAB相補株ではPT耐性が回復した．一方，Sakai型tehAB相補株では，MICの顕著な上昇は見られなかった．このため，変異型tehAがEHEC O157のPT耐性を高めることが示された．野外株では2.6%（44株）がterオペロンの全体または一部を欠失していたが，tehAの変異（Ala299Thr）はY32859株以外では認められなかった．これらの結果から，tehAの同変異は稀であるが，ter オペロン非保有大腸菌でのPT耐性につながるためEHEC分離の上で注意が必要と考えられた．