[II-P70-03] 出生前デキサメサゾン投与によるラット胎仔心臓のHippo-Yapシグナル伝達経路への影響
Keywords:Hippo経路, グルココルチコイド, 胎仔
我々は以前から早産児モデルラットを用いて，出生前GC投与は胎児心臓の心筋細胞の増殖を促進させ，GCが心臓の発達に関わることを報告してきた．心筋細胞増殖のメカニズムには様々な経路が存在するが，近年，細胞増殖を制御するHippo-Yapシグナル伝達経路が注目されている．我々は出生前GC投与がHippo経路とその抑制因子であるAgrinに対する影響を検討した．Wister系妊娠ラット（8 週齢）の妊娠17日，19日に2日間デキサメサゾン(DEX) 0.5，1.0，2.0 mg/kgを皮下投与し，19日，21日にそれぞれ帝王切開し胎仔の心臓を摘出した（胎仔群）．また妊娠20日, 21日に2日間DEXを同様に皮下投与し，自然分娩で出生した日齢1日の新生仔ラットから心臓を摘出した（新生仔群）．対照群はDEX 溶媒のごま油を同容量投与した．さらに8週齢の成熟ラットの心臓を摘出し比較した（成熟群）．Agrin，Yap，リン酸化Yap（p-Yap）の蛋白発現量はウエスタンブロット法，局在を免疫組織染色で検討した．
Agrin発現量は胎仔群，新生仔群では日齢とともに増加する傾向を認め，成熟群では有意に増加した．胎仔群ではGC用量依存的にAgrin発現量が増加する傾向を認めた．免疫染色ではAgrinは胎仔群，新生仔群とも心内膜側に，成熟群では心内膜側と血管周囲に局在していた．Yapおよびp-Yapの発現量は，21日目の胎仔群と成熟群は19日目の胎仔群よりも低下し，一方，新生仔群は19日目の胎仔群と同等レベルであった．出生前GC投与により19，21日目の胎仔群の全蛋白質量のYapとp-Yapの発現量は増加傾向を示した．核蛋白ではYap発現量は，GC 0.5, 1.0 mg/kg投与で増加傾向を，2.0 mg/kg投与で減少傾向を示し，p-Yapは殆ど検出されなかった．以上の結果から，出生前GC投与は胎仔の心臓において，Yapの発現に影響し，心筋細胞増殖に関与する可能性が考えられた．
Agrin発現量は胎仔群，新生仔群では日齢とともに増加する傾向を認め，成熟群では有意に増加した．胎仔群ではGC用量依存的にAgrin発現量が増加する傾向を認めた．免疫染色ではAgrinは胎仔群，新生仔群とも心内膜側に，成熟群では心内膜側と血管周囲に局在していた．Yapおよびp-Yapの発現量は，21日目の胎仔群と成熟群は19日目の胎仔群よりも低下し，一方，新生仔群は19日目の胎仔群と同等レベルであった．出生前GC投与により19，21日目の胎仔群の全蛋白質量のYapとp-Yapの発現量は増加傾向を示した．核蛋白ではYap発現量は，GC 0.5, 1.0 mg/kg投与で増加傾向を，2.0 mg/kg投与で減少傾向を示し，p-Yapは殆ど検出されなかった．以上の結果から，出生前GC投与は胎仔の心臓において，Yapの発現に影響し，心筋細胞増殖に関与する可能性が考えられた．