一般口演17（II-OR17）
心筋心内膜疾患 II

[II-OR17-01] iPS細胞を用いたDNM1-L遺伝子変異による心筋機能障害機序の解析

^○大澤 麻登里¹, 田村 義輝¹, 鏡 和樹², 伊藤 正孝³, 藤田 泰典⁴, 馬場 志郎⁵, 松本 志郎⁶, 大竹 明⁷, 足立 健², 齋藤 潤⁸, 野々山 恵章¹ (1.防衛医科大学校 小児科学講座, 2.防衛医科大学校 循環器内科学講座, 3.防衛医科大学校 再生発生学講座, 4.東京都健康長寿医療センター研究所 生体調節機能, 5.京都大学医学部附属病院 小児科, 6.熊本大学 生命科学研究部 小児科学講座, 7.埼玉医科大学 小児科/ゲノム医療科, 8.京都大学iPS細胞研究所 臨床応用研究部門)

キーワード：DNM1-L, ミトコンドリア, 心筋症

【背景】DNM1-L(Dynamin-1-like protein) はミトコンドリアの分裂とマイトファジーに関連するタンパクである。我々は心筋症を発症した乳幼児２名のExome解析を行いDNM1-L遺伝子変異を同定した。これまでDNM1-L変異により心筋症を発症した症例報告は認めるが、発症機序については不明な点が多く、またヒト心筋細胞を用いた基礎研究報告はない。今回我々はDNM1-L変異による心筋機能障害の機序について解析した。【目的】DNM1-L 変異を有する2名の患者から樹立したiPS細胞を心筋細胞に分化させ、ミトコンドリア形態、ミトコンドリア機能、心筋細胞のCa²⁺動態、収縮能・拡張能等の機能解析を行った。【結果・考察】疾患iPS由来分化心筋細胞では著しく伸長した異常ミトコンドリア形態を呈していた。また、JC-1染色にてミトコンドリア膜電位の低下を認め、ミトコンドリア活性の低下が示唆された。OROBOROS Oxygraph-2kを用いた分析ではOCR (Oxygen Consumption Rate) の低下を認め、ミトコンドリアでのATP産生低下が考えられた。さらに細胞内Ca²⁺動態解析では、筋小胞体へのCa²⁺再取り込みを担うSERCA2 の機能指標である 50% time to decay (T50) がコントロールと比較して有意に延長していた。SERCA2 はATP依存性チャネルであり、ATP産生低下によりSERCA2の機能が低下し、Ca²⁺動態異常をもたらすと考えられた。また、高精度Live Cell Imaging Systemにて収縮能・拡張能の定量的解析を行い、頻拍誘発下にてiPS由来分化心筋細胞ではコントロールに比して有意に収縮能・拡張能の低下を認めた。以上の結果より、DNM1-L変異はミトコンドリアでのATP産生が低下すること、さらにはATP不足がSERCA2の機能低下をもたらしCa²⁺handlingを障害することが、心筋機能低下を引き起こすと考えられた。【結論】DNM1-L変異は、ミトコンドリア形態異常および機能低下とATP産生低下、Ca²⁺動態異常をもたらし、心筋機能障害を起こすと考えられた。