一般演題ポスター
炎症

[P-059] アクチン結合タンパク質は細胞内外におけるコラーゲン代謝に影響を及ぼす

The actin binding proteins have an effect on the intra and extracellular collagen metabolism.

目澤 優^1,2，小方 頼昌^1,2／Masaru Mezawa^1,2，Yorimasa Ogata^1,2 (日本大学松戸歯学部歯周治療学講座¹，日本大学口腔科学研究所²／Department of Periodontology, Nihon University School of Dentistry at Matsudo¹，Research Institute of Oral Science²)

研修コード：2206

Keywords:細胞接着、コラーゲン代謝、アクチン結合タンパク質

【目的】細胞と細胞外基質の接着には，インテグリンやアクチンフィラメントに結合するフィラミンAなどのアクチン結合タンパク質の存在が重要である。本研究では，アクチン結合タンパク質が細胞内外におけるコラーゲン代謝に影響を及ぼすかを調べた。
【材料および方法】マウス線維芽細胞（FLNa WT）とピューロマイシン誘導性フィラミンAノックダウンマウス線維芽細胞（FLNa KD）を使用して，qPCR法とイミノブロット法によりマトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）およびコラーゲン分解産物の発現を検索した。免疫蛍光染色で，アクチン結合タンパク質および細胞外コラーゲンの発現を分析した。
【結果および考察】接着斑の分析では，培養6時間後にFLNa KDのα-SMA数は，FLNa WTと比較して減少した。接着斑マーカーと細胞外コラーゲン分解産物である3/4コラーゲンとの共免疫染色では，培養6時間後のタリン，α-SMAと3/4コラーゲンとの共存に違いが認められた。活性化β1インテグリンの発現はFLNa WTが，FLNa KDと比較して上昇した。細胞周囲のコラーゲン合成および分解については，FLNa KDが，FLNa WTと比較してMMP-9の発現が上昇し，3/4コラーゲンの発現も上昇した。細胞内コラーゲン分解酵素であるカテプシンBやリソソーム蓄積の指標となるLAMP2の発現はFLNa WTで上昇した。以上のことより，アクチン結合タンパク質であるフィラミンAが，細胞周囲でのコラーゲン代謝および接着斑の形成に影響を与えることが分かった。
（会員外協力者：Christopher McCulloch）