[P3-2-17] Sorting nexin 27 contributes to barrier function of gingival epithelium by localizing tight junction-related protein to plasma membrane
Keywords:歯周病、JAM1、SNX27
【背景】
歯周病を随伴する症候群であるダウン症候群は、21番染色体のトリソミーにより生じる。また、sorting nexin 27 (SNX27) はエンドソームから細胞膜への逆行性輸送に関与するタンパクであり、本染色体異常をもつ宿主細胞では SNX27 遺伝子発現が減少すると報告されている。一方、歯肉上皮細胞のタイト・ジャンクション (TJ) 関連タンパクも、エンドソームを経由し細胞膜へ輸送される。本研究では、TJ 関連タンパクである junctional adhesion molecule 1 (JAM1) を介して、 SNX27 が歯肉上皮のバリア機能に及ぼす影響を調べた。
【方法】
SNX27 遺伝子に対する shRNA を発現するヒト歯肉上皮細胞を作成し、JAM1 の局在を共焦点顕微鏡で観察した。 歯肉上皮細胞層の異物透過性を調べるため、上記細胞をセルカルチャーインサート上で単層培養し、lipopolysaccharide (LPS) および peptidoglycan (PGN) からなる蛍光トレーサーをインサート上部の培地に添加した。30分後、インサート下部の培地に透過したトレーサー量を分光光度計で測定した。
【結果】
SNX27 の発現を抑制した歯肉上皮細胞では、歯肉上皮細胞における JAM1 の局在が細胞膜から初期エンドソームに変移し、歯肉上皮細胞層の LPS および PGN に対する透過性が亢進した。この透過性の亢進は、SNX27 のノックダウンによる上記変位に抵抗性をもつ、JAM1 キメラタンパクの過剰発現により抑制された。これらの結果より、SNX27 は JAM1 の細胞膜への輸送を介し、歯肉上皮細胞のバリア機能に関与することが示唆された。このことは、21番染色体トリソミーをもつ歯肉上皮のバリア機能の理解の一助になる可能性がある。
歯周病を随伴する症候群であるダウン症候群は、21番染色体のトリソミーにより生じる。また、sorting nexin 27 (SNX27) はエンドソームから細胞膜への逆行性輸送に関与するタンパクであり、本染色体異常をもつ宿主細胞では SNX27 遺伝子発現が減少すると報告されている。一方、歯肉上皮細胞のタイト・ジャンクション (TJ) 関連タンパクも、エンドソームを経由し細胞膜へ輸送される。本研究では、TJ 関連タンパクである junctional adhesion molecule 1 (JAM1) を介して、 SNX27 が歯肉上皮のバリア機能に及ぼす影響を調べた。
【方法】
SNX27 遺伝子に対する shRNA を発現するヒト歯肉上皮細胞を作成し、JAM1 の局在を共焦点顕微鏡で観察した。 歯肉上皮細胞層の異物透過性を調べるため、上記細胞をセルカルチャーインサート上で単層培養し、lipopolysaccharide (LPS) および peptidoglycan (PGN) からなる蛍光トレーサーをインサート上部の培地に添加した。30分後、インサート下部の培地に透過したトレーサー量を分光光度計で測定した。
【結果】
SNX27 の発現を抑制した歯肉上皮細胞では、歯肉上皮細胞における JAM1 の局在が細胞膜から初期エンドソームに変移し、歯肉上皮細胞層の LPS および PGN に対する透過性が亢進した。この透過性の亢進は、SNX27 のノックダウンによる上記変位に抵抗性をもつ、JAM1 キメラタンパクの過剰発現により抑制された。これらの結果より、SNX27 は JAM1 の細胞膜への輸送を介し、歯肉上皮細胞のバリア機能に関与することが示唆された。このことは、21番染色体トリソミーをもつ歯肉上皮のバリア機能の理解の一助になる可能性がある。