[P29-52] 筋原線維とアクトミオシンのADP分解活性
【目的】アクトミオシン（AM）はアクチンとミオシンの結合物であり，ATPを分解してADPとリン酸にすることはよく知られている．各種リン酸塩がAMを解離させる現象を調べる過程で，筋原線維がADPを分解していると考えられる現象を見出したので，その詳細を調べた．【方法】筋原線維ならびにAMは市販のトリ胸肉から常法により調製した．それらのADP分解活性は，遊離したリン酸をモリブデン酸アンモニウムとアミドール試薬で発色させる方法で測定した．ATP, ADP, AMPは逆相系カラムShimpak CLC-ODS(M)を用いたHPLCにより定量した．【結果】ADPに筋原線維とAMを作用させた結果，いずれにも約0.01 µmol Pi/min/mgの分解活性が認められた．次に，AMを10 mM Tris-HCl(pH 7.2)/0.2 M KCl/1 mM NaN3/0.02% Triton X-100に懸濁した後，遠心分離して上清と沈殿に分け，それぞれの画分のADP分解活性を測定した．その結果，活性はいずれにも認められなかったが，上清と沈殿を再混合したものには活性が認められた．AMを0-20分間作用させたADPをHPLCで分析した結果，AMPが経時的に増加した．また，作用20分間では，少量のATPも検出された．これらの結果は，AMには2ADP→ATP+AMPを触媒するミオキナーゼが吸着していることを示唆している．