繁殖・生殖工学

[IV-18-05] Hippoシグナル抑制によるウシ初期卵胞の活性化法の開発

*石川 真空¹、庄司 宙希¹、畠山 ひなの¹、横尾 正樹²、河村 和弘³、小林 仁¹ (1. 宮城大食産業、2. 秋田県大生物資源、3. 国際医療大医)

【目的】卵巣組織断片化やアクチン重合処理を行うことで，初期の卵胞発育が誘導されることがマウスやヒトにおいて報告されている．そこで，本実験では卵巣組織の断片化およびアクチン重合処理がウシ卵巣の卵胞発育に及ぼす影響について調べた．【方法】未経産肉牛卵巣を食肉処理場で採取後，直ちに１mm角の大きさに細切し，38.5℃， 5％ CO₂で2, 4, 6時間培養を行った．アクチン重合剤としてS1PおよびLPAについて卵胞発育への影響を調べた．卵巣組織のHippoシグナル抑制を確認するため，YAPタンパク質の細胞内局在を免疫染色により調べた．リアルタイムPCRにより卵巣組織断片中のHippoシグナル下流の遺伝子発現定量解析を行った．【結果】培養後6時間後，YAPタンパク質が顆粒膜細胞の細胞質から核内へ移行していることが観察され，Hippoシグナルの抑制が示唆された．卵巣組織の小断片化培養による遺伝子発現を調べたところ，培養後にCCN2およびBirc5遺伝子が増加する傾向を示した．アクチン処理重合剤を添加して培養を行った卵巣組織断片では，LPAに比べS1P添加区でCCN2およびFGF1遺伝子の発現が増加する傾向が見られた．以上の結果より，卵巣組織小断片化およびS1Pの添加が初期の卵胞発育に有効であることが示唆された．