5. Animal products technology

[P5-07] ガセリシンT・S構造遺伝子の塩基配列決定とその変異体の検索

〇Haruna Naya¹, Rika Okai, Yuki Harada, Go Naito², Yasushi Kawai^1,2, Tetsuya Masuda^1,2 (1.Nihon Univ., 2.Nihon graduate school)

【目的】ガセリシンT・S（GT・GS）はヒト腸管由来の乳酸菌Lactobacillus gasseriから生産される二成分性のバクテリオシン（抗菌ペプチド）である。これまでGT・GS遺伝子の塩基配列をLb. gasseri LA158とLA327の2株より解読し、またGT・GS遺伝子保有株の抗菌活性値は各株間で異なることを明らかにしてきた。本研究では抗菌活性値の異なる原因がGT・GSの変異である可能性を含めて、当研究室保有のLb. gasseriにおけるGT・GS構造遺伝子（gatAX、gasAX）の塩基配列決定と各変異体の探索を試みた。

【方法】Lb. gasseri JCM株（12株）のchrDNAを鋳型としたPCR増幅後にサンガーシーケンス法でgatAX、gasAXの塩基配列を決定した。また、得たアミノ酸配列についてGOR法を用いて二次構造を予測した。

【結果】GTで12株、GSでは4株の塩基配列を決定したところ、gatAXとgasAに変異は見られなかったが、JCM 1130、5344の2株においてgasXで172番目の塩基AがG（アミノ酸では成熟体GasXの42残基目TがA）になった置換変異体が確認された。また、GasX（T42A）の二次構造予測からは野生型GasXの42残基付近に見られたC末端のターンが変異型GasXで消失しており、GSの抗菌活性に何らかの影響を及ぼす可能性が示唆された。