[ODP-026] Killing mechanism of wild ciliate Anteglaucoma CS11A by Legionella pneumophila JR32
【背景・目的】Legionella pneumophila (Lp)はレジオネラ肺炎の病原菌で，通常河川や冷却塔に生息する．同様の環境に原生動物の繊毛虫が生息しており，当研究室ではLpと3種の繊毛虫Anteglaucoma sp. CS11A（下水由来），Colpoda E6（シンク由来），Tetrahymena thermophila IB （実験室株）との共培養実験を行い，二者間の相互作用が異なることを報告した（第93回日本細菌学会総会，2020）．本研究ではAnteglaucomaがLpに4型分泌装置依存的に殺滅されることを明らかにし，殺滅に関わる細菌側の因子を探索した．
【材料・方法】Lp JR32および4型分泌装置欠損株JR32 Δdot/icm （静岡県立大 三宅博士より分与）と，Anteglaucoma CS11A，Tetrahymena IBの2種の繊毛虫を各々MOI 10,000で混和し室温で共培養した．経時的に捕食されたLpを観察し，繊毛虫数を算定した．また，Lp JR32トランスポゾン (Tn) 挿入変異株ライブラリーを作成し，Anteglaucomaへの感受性が変化した株の選別と捕食されたLpの観察を行った．
【結果・考察】Lp JR32と共培養したAnteglaucomaは培養2日後に全て死滅したが，JR32 Δdot/icmとの共培養では死滅は見られずAnteglaucomaが4型分泌装置依存的にLpに殺滅されることが分かった．このような殺滅はTetrahymena IBでは見られずAnteglaucomaに特有の現象といえる．Tn挿入変異株ライブラリーのスクリーニングから4型分泌装置をコードする遺伝子の他，膜輸送に関わる遺伝子が殺滅に関わる候補として同定された．またAnteglaucomaに取り込まれたLpが食胞からエスケープし細胞質に散在する様子が観察され，このLpの動態がAnteglaucomaの殺滅に関与した可能性がある．
（非会員共同研究者: 玄行理子）