一般演題ポスター
微生物（Porphyromonas gingivalis）

[P-029] コウボクはPorphyromonas gingivalis mglを介したメチルメルカプタン産生を抑制する

The oriental medicine, magnoliaceae, inhibits the production of methyl mercaptan via mgl mRNA.

佐藤 陽子，應原 一久，新谷 智章，北川 雅恵，小川 郁子，加冶屋 幹人，水野 智仁，藤田 剛，栗原 英見／Yoko Sato，Kazuhisa Ouhara，Tomoaki Shintani，Masae Kitagawa，Ikuko Ogawa，Mikihito Kajiya，Noriyoshi Mizuno，Tsuyoshi Fujita，Hidemi Kurihara (広島大学／Hiroshima University)

研修コード：2807

Keywords:口臭、メチルメルカプタン、Porphyromonas gingivalis

【目的】P. gingivalis（Pg）は揮発性硫黄化合物（VSC）を産生し，VSCは口臭の原因になる。METaseはPgが保有するアミノ酸分解酵素であり，VSCであるメチルメルカプタン（MM）を合成する。生薬であるコウボクがMetaseをコードするmgl遺伝子を制御して，MM産生を抑制する。本研究ではコウボクによるPgメチルメルカプタン産生制御のメカニズムの解明を目的に複数のPg菌株を用いて検討した。
【材料および方法】Pgの分離：広島大学病院口臭外来受診患者の唾液を，血液寒天培地に播種後，生育した黒色コロニーから16s rRNAをPCR法で同定した。
MM産生量の測定：試験管内に，PBS1ml中にPg 10⁸CFUになるよう調整し，L-メチオニン，コウボクを添加し，60分培養した。MM産生量はオーラルクロマで測定した。
mgl発現解析：ガス測定と同様にサンプル調整し，totalRNAを精製した。mgl発現はreal-time PCRで評価した。
バイオフィルム形成実験：Pg W83 10⁷CFUと，F. nucleatum ATCC 24597（Fn）10⁶CFUを96wellプレートで共培養し，バイオフィルムをクリスタルバイオレットで染色後，吸光度で評価した。
【結果】Pg標準株，臨床分離株ともに，L-メチオニンの濃度依存的にMM産生が増加した。コウボクはPg MM産生を抑制し，Pgの線毛をコードする遺伝子fim typeで抑制率に違いが認められた。コウボクはバイオフィルム形成を抑制した。
【結論】コウボクがmRNAレベルでPgのMM産生を抑制し，バイオフィルム形成抑制にも関与することが示唆された。