一般演題ポスター
炎症

[P-050] 歯肉上皮細胞におけるヒトFDC-SP遺伝子発現に対するmiR-223の影響

Effects of miR-223 on human FDC-SP gene expression in gingival epithelial cells

岩井 泰伸¹，能田 佳祐¹，山﨑 瑞穂¹，加藤 彩子¹，目澤 優¹，高井 英樹^1,2，中山 洋平^1,2，小方 頼昌^1,2／Yasunobu Iwai¹，Keisuke Noda¹，Mizuho Yamazaki¹，Ayako Kato¹，Masaru Mezawa¹，Hideki Takai^1,2，Yohei Nakayama^1,2，Yorimasa Ogata^1,2 (日本大学松戸歯学部歯周治療学講座¹，口腔科学研究科²／Department of Periodontology, Nihon University School of Dentistry at Matsudo¹，Research Institute of Oral Science, Nihon University School of Dentistry at Matsudo²)

研修コード：2504

Keywords:濾胞性樹状細胞分泌タンパク質、マイクロRNA、腫瘍壊死因子

【目的】FDC-SPは濾胞樹状細胞で発現する低分子分泌タンパク質であり，歯根膜および歯肉接合上皮で発現する。マイクロRNA（miRNA）は約22塩基の一本鎖ノンコーディングRNAで，標的mRNAの3’末端非翻訳領域（3’-UTR）に結合し翻訳を抑制する。我々は，炎症歯肉におけるmiR-223の発現増加を以前に報告した。今回は，歯肉上皮細胞でのFDC-SP遺伝子発現に対するmiR-223の影響を解析した。
【材料および方法】ヒト歯肉上皮（Ca9-22）細胞にmiR-223発現プラスミドを導入し，TNF-αで刺激後，miR-223標的因子であるIKKαとFDC-SPの発現量をリアルタイムPCRとウェスタンブロットで解析した。FDC-SP遺伝子プロモーター（-948～+60）を挿入したルシフェラーゼ（LUC）プラスミドのLUC遺伝子下流にFDC-SP3’-UTR 1～984配列を挿入したコンストラクト（FDC-SP 3’LUC）を作成し，miR-223過剰発現時のLUC活性を解析した。
【結果】TNF-α刺激はIKKαとFDC-SPのmRNAおよびタンパク質量を増加させ，miR-223過剰発現はそれぞれを部分的に抑制した。FDC-SP 3’LUCをCa9-22細胞に導入し，TNF-α刺激するとLUC活性は増加し，miR-223過剰発現でLUC活性は部分的に抑制された。ヒト歯肉上皮細胞においてFDC-SP 遺伝子発現はTNF-α刺激で増加したが，miR-223はTNF-αシグナル伝達経路のIKKαを抑制し，FDC-SP遺伝子発現を直接および間接的に調節すると考えられた。