[2P-2] Poster 2 (2P-38ー2P-88)

[2P-38] Studies on the interaction between αSynuclein and Fatty Acid Binding Protein, FABP3 in eukaryotic cells

^○Moe Miyabe¹, Hanae Yamamoto¹, Naoya Fukui¹, Kunihiro Hongo^1,2, Tomohiro Mizobata^1,2, Kohji Fukunaga³, Yasushi Kawata^1,2 (1.Dept. of Chem. and Biotech., Grad. Sch. of Eng., Tottori Univ., 2.Dept. of Biomed. Sci., Grad. Sch. of Med. Sci., Tottori Univ., 3.Dept . of Pharmacol., Grad. Sch. of Pharm. Sci., Tohoku Univ.)

αシヌクレイン(αSyn)は細胞内で凝集体を形成することでパーキンソン病を発症する原因蛋白質の一つである。我々はこれまでに，Thioflavin-T蛍光色素を用いたin vitroにおけるαSynのアミロイド線維形成に対して，脂肪酸結合蛋白質，FABP3がαSynの線維形成を抑制することを明らかにした。また，ANS蛍光測定と水晶振動子マイクロバランス法(QCM)を用いた実験により，αSynはFABP3と1:1の複合体を形成し，その相互作用にαSynのC末端が大きく関与していることを明らかにした。しかし，FABP3の細胞内におけるαSynとの相互作用や，αSynの凝集形成に対する影響など，その詳細については未解明な点が多い。そこで本研究では，細胞内でのαSynとFABP3の発現および挙動を可視化するシステムを構築し，生細胞内におけるαSynとFABP3の相互作用を解明することにした。マウス神経芽細胞腫, Neuro2a細胞へGFP-αSynとFABP3-mCherry発現遺伝子を導入し，αSynとFABP3の発現とそれらの相互作用を融合しているGFPとmCherryの蛍光で可視化できるシステムを構築した。そしてこのシステムを用いたGFPとmCherry間の蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)解析により，細胞内においてもαSynとFABP3は相互作用をしていることを明らかにした。また，αSynのC末端欠損遺伝子の導入やαSynのC末端に相当するペプチドを添加したところ，細胞内においてもαSynのC末端領域がFABP3との相互作用に働いていることが判明した。