[3P-2] Poster 3 (3P-48ー3P-87)

[3P-65] Structural change mechanism of HspB1 from CHO cell

^○Niina Kurokawa¹, Manami Nakamura¹, Ken Morishima², Rintaro Inoue², Masaaki Sugiyama², Masafumi Yohda¹ (1.Dept. of Biotechnol. Tokyo Univ. of Agric. and Technol., 2.Institute for Integrated Radiation and Nuclear Science, Kyoto University)

Small heat shock protein(sHsp)はタンパク質の品質管理を担う分子シャペロンであり、比較的保存性の高いα-crystallin domainとN末端及びC末端領域から構成される。sHspは通常はオリゴマー構造で存在する。熱などのストレス条件下において解離し、疎水性領域を露出することで、変性タンパク質と相互作用して凝集を防いでいる。哺乳類には11種類のsHsp (HspB1 - 11)が存在するが、機能や構造に関する研究は遅れている。最近、Human HspB1が、３つの2量体から形成した6量体が4つ会合した24量体構造を形成することが報告された。また、HspB1に存在する１つのシステインがダイマー間にジスルフィド結合を形成することが示唆された。本研究では、CHO細胞由来HspB1(CgHspB1)のオリゴマー構造変化におけるジスルフィド結合の役割の解析を目的とした。Wild type (WT)とC145S変異体(C145S)を用いた超遠心分析において、C145SはWTと比べてオリゴマー構造の沈降係数が大きくなった。ほぼ同じ分子量と計算されたことから、WTは歪みのある形状のオリゴマーであり、C145Sは球状に近い形状のオリゴマーであることが示唆された。C145Sが解離構造を取らなかったことから、オリゴマー構造の形状の歪みが、オリゴマー解離システムに関与することが示唆された。さらに、クエン酸シンターゼの凝集抑制活性実験において、C145Sがシャペロン活性を示したことから、完全な解離構造でなくても、オリゴマー構造が緩むことで、シャペロン活性を示すことが示唆された。