[P29-37] 種々のウシ遺伝子群を応用したウシiPS細胞樹立の試み
【目的】ウシ遺伝資源を育種素材として活用することを目指して，iPS細胞の樹立研究に着手した．本研究では，ウシ6転写因子を同時に発現するベクターを構築し，種々のウシ遺伝子群を組み合わせてウシiPS細胞の樹立を試みた．【方法】ウシ6転写因子(OCT4，SOX2，KLF4，NANOG，LIN28，c-MYCまたはL-MYC)を同時に発現する単一のベクターを構築した．構築したベクターの機能を検証するため，マウス胎仔線維芽細胞由来E6/E7-MEF細胞に遺伝子導入し，マウスiPS細胞を誘導できるか検証した．また，初代ウシ線維芽細胞に遺伝子導入してウシiPS細胞を誘導できるか試みた．【結果】ウシ6転写因子発現ベクターを導入したE6/E7-MEF細胞において，マウスiPS細胞に特徴的なアルカリフォスファターゼ活性を示す，ドーム状コロニーが形成された．そこでL-MYCを含むウシ6転写因子発現ベクターを初代ウシ線維芽細胞に遺伝子導入したが，iPS様細胞コロニーは得られなかった．一方，c-MYCを含むウシ6転写因子発現ベクターと7種の遺伝子（H1FOO，AICDA，TERT，p53DD，Antisense MBD3，GLIS1，DPPA3 ）を同時に導入した場合，ベクター由来の蛍光タンパク質を発現する，iPS細胞に特徴的なドーム状のコロニーが形成された．