[3Ba] 生理活性物質

[3Ba-09] 溶解度分別法を利用したグリチルリチン精製法の開発

*本夛 崚資¹、西野 蛍汰²、福田 悠作²、三輪 彦輝²、片野 肇¹、高橋 正和¹ (1. 福井県立大・院・生物資源、2. 福井県立大・生物資源)

キーワード：甘草、グリチルリチン、溶解度分別

【目的】グリチルリチン（GL）は甘草（Glycyrrhiza glabra）の根に含まれ，抗炎症作用や抗ウイルス作用など多様な生理活性を示し，漢方薬成分として利用価値が高い．また本化合物はトリテルペノイドサポニンであり，グルクロン酸残基を2残基含む配糖体である．我々はこれまでにホウ砂水溶液を用いて大豆全粒粉末のメタノール抽出物から簡便にB型大豆サポニンを精製する手法を開発しており，カラム精製前の前処理法として極めて有用である(Anal． Sci．，2019)．この手法はサポニンの糖鎖に含まれるcis-diol構造を利用しており，類似構造を有する配糖体，GLの簡便精製手法の開発にも応用できると期待された
【方法】甘草粉末のメタノール抽出物(画分A)やアンモニア水抽出物(画分Ⅰ)から得られた精製標品について，逆相HPLC解析でGL量を求め，精製回収率を算出した．純度はGL量を乾燥重量で割って求めた．
【結果】GLは水への溶解性は低いが，ホウ砂水溶液には容易に溶解し，さらに酸性にすると再沈殿する．この性質を利用して画分A（GL純度8.5%）をホウ砂水溶液と希塩酸で処理したところ，高極性不純物が除かれて画分B（純度31%，回収率94%）が得られた．次に画分Bに含まれる低極性不純物を除去するため，Sep-Pak C18固相抽出にて画分C（純度40%，回収率35%）を得たのち，逆相分取HPLCにて画分D（純度＞90%，回収率10%）を取得した．しかし固相抽出やカラム精製は回収率を低下させるため，甘草粉末の抽出段階で低極性不純物を減らすべく，アンモニア水抽出物(画分Ⅰ；純度6.7%)の調製を検討した．画分Ⅰには低極性不純物が少なく，画分Ⅰをホウ砂水溶液と希塩酸で処理することで，最終的に高極性不純物が除去された画分Ⅱ（純度70%，回収率70%）を簡便に得ることに成功した．