9:15 AM - 9:30 AM
[3Ea-02] Searching for DPP-IV inhibitory peptides from edible microalgae proteins.
Keywords:DPP-IV inhibitory, diabetes, peptides, hydrolysates
【目的】血糖値の上昇抑制作用をもつDipeptidyl Peptidase (DPP)-Ⅳ阻害剤の中でも，食品タンパク質由来のDPP-Ⅳ阻害ペプチドは，その高い有効性と安全性から多くの注目を集めている．本研究では，タンパク質を豊富に含有する食用微細藻類に着目し，これらを食品加工用のプロテアーゼにより加水分解し，DPP-Ⅳ阻害ペプチドの探索を行い，健康機能性素材として活用することを目的とした．
【方法】微細藻類の乾燥粉末をミリQ水に懸濁し，凍結融解および超音波処理を施した後，硫安沈殿によりタンパク質を回収した．このタンパク質抽出液に対して，4種の食品加工用プロテアーゼを用いて，単独あるいは2種のプロテアーゼを組み合わせて加水分解した．得られた10種の加水分解物について，DPP-IV Inhibitor Screening Assay Kit(Cayman Chemical社)を用いてDPP-Ⅳ阻害活性を測定した．さらに，DPP-Ⅳ阻害活性が最も高かった加水分解物について，限外ろ過フィルターにより3 kDa未満のペプチドを回収し，分取HPLCに供した．得られた各画分についてDPP-Ⅳ阻害活性を測定した．
【結果】食用微細藻類由来タンパク質の10種類の加水分解物のうち，最も高いDPP-Ⅳ阻害活性を示した分解物を用いて，限外ろ過フィルターによる分離と分取HPLCによる分画を行った後，得られた画分についてDPP-Ⅳ阻害活性を測定した．その結果，複数の画分において，高いDPP-Ⅳ阻害活性が見られた．このことから，食用微細藻類由来タンパク質の加水分解物の中に，複数のDPP-Ⅳ阻害ペプチドが生成している可能性が示唆された．
【方法】微細藻類の乾燥粉末をミリQ水に懸濁し，凍結融解および超音波処理を施した後，硫安沈殿によりタンパク質を回収した．このタンパク質抽出液に対して，4種の食品加工用プロテアーゼを用いて，単独あるいは2種のプロテアーゼを組み合わせて加水分解した．得られた10種の加水分解物について，DPP-IV Inhibitor Screening Assay Kit(Cayman Chemical社)を用いてDPP-Ⅳ阻害活性を測定した．さらに，DPP-Ⅳ阻害活性が最も高かった加水分解物について，限外ろ過フィルターにより3 kDa未満のペプチドを回収し，分取HPLCに供した．得られた各画分についてDPP-Ⅳ阻害活性を測定した．
【結果】食用微細藻類由来タンパク質の10種類の加水分解物のうち，最も高いDPP-Ⅳ阻害活性を示した分解物を用いて，限外ろ過フィルターによる分離と分取HPLCによる分画を行った後，得られた画分についてDPP-Ⅳ阻害活性を測定した．その結果，複数の画分において，高いDPP-Ⅳ阻害活性が見られた．このことから，食用微細藻類由来タンパク質の加水分解物の中に，複数のDPP-Ⅳ阻害ペプチドが生成している可能性が示唆された．