[2Ap] 栄養成分（タンパク質，炭水化物，脂質，ビタミン，ミネラル）

[2Ap-09] ミズクラゲの主要コラーゲンおよびその構成サブユニットの生化学的特性

*田邉 瞭太¹、水田 尚志¹、細井 公富¹、横山 芳博¹ (1. 福井県大・海洋生資)

キーワード：コラーゲン、未利用水産資源、タンパク質

目的：クラゲ類のコラーゲンは現在化粧品や研究用試薬等に利用されている．我々のグループでは内因性プロテアーゼの活性によりクラゲ組織を自己消化させ，同時にコラーゲンを可溶化する方法を確立した．これにより得られる内因性プロテアーゼ可溶化コラーゲン（ＥＳＣ）はＳＤＳ－ＰＡＧＥ上で脊椎動物Ⅰ型コラーゲンとは異なる特異的なパターンを示すが，これに含まれるコラーゲン分子種ならびに各構成サブユニットの性状については殆ど知見がない．本研究ではミズクラゲからＥＳＣを回収し，主要コラーゲン分子種の精製とサブユニット組成の解明を目指した．
材料と方法：生鮮ミズクラゲを凍結し，低温で自己消化させＥＳＣを得た．ＥＳＣまたはその熱変性物を陽イオン交換クロマトグラフィーまたはゲルろ過に供し，主要分子種または構成サブユニットを精製した．得られたコラーゲンやそのサブユニットをＳＤＳ－ＰＡＧＥ，アミノ酸分析またはペプチドマッピングに供し，それらの特性評価を行った．
結果と考察：ＥＳＣはＳＤＳ－ＰＡＧＥにおいて１５０－１６０Ｋ，８０－９０Ｋ，５０Ｋ，２５Ｋに明瞭なバンドを示し，コラーゲンに典型的なアミノ酸組成を示した．ＥＳＣを陽イオン交換クロマトグラフィーに供した結果，ＥＳＣを構成する主要コラーゲン分子種は上記６成分をいずれも含むことが分かった．変性させたＥＳＣを陽イオン交換クロマトグラフィーおよびゲルろ過に供した結果，画分Ａ（２５Ｋに１本），画分Ｂ①（５０Ｋに１本），画分Ｂ②（８０Ｋに１本），画分Ｃ（１５０Ｋに１本），画分Ｄ（８０－９０Ｋに２本），画分Ｅ（１６０Ｋに１本）に分離した．アミノ酸分析では画分Ａと画分Ｂ①はグリシン含有率が低く，非コラーゲン性の領域を含むことが示唆された．以上より，ＥＳＣに含まれる主要コラーゲン分子種が単離され，これを構成する一部のサブユニットは非コラーゲン性の領域を含む可能性が示された．