3. Reproduction/Reproductive technology

[P3-32] ウシES細胞の樹立培養（Bogliotti et al.,2018）を応用したウシiPS細胞の作出

〇Yuto Kita¹, Yuka Nishimura¹, Masayuki Kobayashi¹ (1.Akita Prefectural University)

マウス体細胞に山中4因子（Oct4，Sox2，Klf4，c-Myc）を遺伝子導入することにより，マウス iPS細胞を樹立することができる。本研究室では，ウシ6転写因子（OCT4，SOX2，KLF4，c-MYC，NANOG，LIN28）発現iPS細胞誘導ベクターを初代ウシ線維芽細胞に遺伝子導入することにより，種々のiPS細胞マーカーを発現する，不死化されたウシiPS細胞を作出することに成功した。しかし，マウスiPS細胞の培養条件（＋KSR＋LIF＋2i）は，ウシiPS細胞の未分化状態維持に不適切であることが判明した。そこで本研究では，ウシES細胞の樹立培養（Bogliotti et al.，PNAS 2018）を改変した培養条件（＋FCS＋FGF2＋IWR1（Wntシグナル阻害剤））を考案した。さらに，ウシ6転写因子発現ベクターと種々の遺伝子（転写因子，酵素等）を同時に初代ウシ線維芽細胞に遺伝子導入し，考案した培養条件により新たなウシiPS細胞の誘導を試みた。その結果，ヒトiPS細胞に酷似した扁平状コロニーを形成する，ウシiPS様細胞（2クローン）を単離することができた。