[PA] 「若手の会」および「インターナショナルポスター賞」

[PA-23] グルコース蛍光検出のためのアルギン酸ゲルカプセル材料の開発

*江頭 深幸¹、成田 千紗¹、宗 伸明^1,2 (1. 佐賀大・農、2. 鹿児島大・院・連農)

【目的】酵素は高選択的な分析系を構築するための優れたツールである．一方，アルギン酸は，褐藻類由来の天然多糖であり，カルシウムイオンの添加によりゲル化する特性を有する．本研究においては，酵素として，西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP），グルコースオキシダーゼ（GOx），蛍光基質としてアンプリフルレッド（AR）を用い，グルコース蛍光検出に適用可能なアルギン酸ゲルカプセルの開発を試みた．

【方法】まず，使用する緩衝液として，Tris/HCl緩衝液，リン酸緩衝液，酢酸緩衝液について検討を行った．続いて，二種のアルギン酸ナトリウム（Na-Alg）としてIL-2，I-3を選択し，Na-Alg濃度を変化させ（0.5%, 1.0%, 1.5%），本ゲルカプセルの構築に適したNa-Algの種類及び濃度を検討した．次に，ゲルカプセル内のHRPとGOxの含有比についても検討を行った．最後に，上述した検討から得られた結果を基に，蛍光基質を含有したアルギン酸ゲルカプセルを作製し，グルコースへの応答性を検討した．

【結果】緩衝液の種類に関し，今回検討した三種の緩衝液の中では，AR発蛍光反応への適合性，並びにゲル安定性の観点から，Tris/HCl緩衝液が最適な緩衝液であると考えられた．続いて，Na-Algの種類及び濃度に関しては，今回検討した条件の中では，Na-AlgとしてI-3を1.0%の条件で用いた時に，蛍光強度の増大度が最も大きくなることが確認できた．続いて，ゲルカプセル内のHRPとGOxの含有比については，酵素重量含有比をHRP：GOx＝8：1とすることに決定した．以上の結果に基づきARを含有したアルギン酸ゲルカプセルを作製し，グルコースへの応答性を検討した．その結果，添加したグルコースの濃度に依存した蛍光強度の増大が見られ，本ゲルカプセルがグルコースの蛍光検出に適用可能であることが確認できた．